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探针法荧光定量PCR试剂盒试验结果如何计算

更新时间:2024-03-12      浏览次数:149
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体的样本中指标含量。
芝麻源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒性能:
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:检测浓度小于1.0U/L。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定指标水平。用纯化的指标抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入相关指标,再与HRP标记的指标抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中指标浓度。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
 
 
 
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